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É hora de repensar os protocolos de vigilância contra Mycoplasma para a introdução de marrãs em granjas negativas

Os protocolos de vigilância contra Mycoplasma hyopneumoniae não devem se tornar uma tradição. Neste artigo, os autores compartilham seu posicionamento, com base em pesquisa de campo, sobre um protocolo de vigilância atualizado e com maior precisão diagnóstica.

Vigilância de doenças em marrãs de reposição

As marrãs de reposição são literalmente "sangue novo" para os rebanhos e são essenciais para a produtividade da granja, proporcionando o avanço genético e mantendo a distribuição dos partos. No entanto, também representam um risco de entrada de patógenos (mesmo nas granjas mais biosseguras) devido à sua introdução frequente, espalhada ao longo do ano, nas granjas receptoras. Vários patógenos de grande importância, incluindo Mycoplasma hyopneumoniae (geralmente referido como micoplasma), são transmitidos principalmente através do contato direto entre suínos infectados e suscetíveis. Portanto, as práticas de biossegurança, incluindo diferentes períodos de isolamento e testes de vigilância, são implementadas rotineiramente em populações de marrãs de reposição para ajudar a prevenir doenças. Em geral, os protocolos de vigilância são projetados para avaliar com precisão o estado de saúde de uma população e detectar patógenos específicos de interesse, de maneira precoce e ativa. Portanto, a vigilância de doenças é a espinha dorsal de um programa robusto de biossegurança.

Estratégias atuais para vigilância de M. hyopneumoniae e suas possíveis limitações

Para vigilância de micoplasma, amostras individuais de sangue e fluido oral são coletadas no nível da baia e geralmente são analisadas quanto a anticorpos e material genético, respectivamente. Amostras de sangue e fluidos orais têm sido os tipos de amostra mais amplamente usados ​​até hoje, em grande parte devido à facilidade de coleta e ao fato de que os mesmos tipos de amostra podem ser usados ​​para detectar vários patógenos, como PRRSv e diarreia epidêmica suína, para as quais as marrãs também devem ser testadas. O uso de amostras de sangue e fluidos orais para testes de micoplasma maximiza o uso de tempo e esforço no programa de vigilância. Embora possa parecer uma vantagem, isso levou ao uso rotineiro de amostras clínicas que podem ser sub-ótimas para a detecção de M. hyopneumoniae, especialmente durante as primeiras semanas após a infecção.

Por outro lado, vários estudos nos últimos anos indicaram que a detecção de micoplasma em suínos vivos é extremamente sensível ao tempo após a infecção inicial e à variação nas amostras clínicas. Essas informações levantam várias questões sobre a precisão dos protocolos de vigilância atuais e sua capacidade de detectar infecção recente por micoplasma em uma população de suínos.

Em um esforço para avaliar os desafios da detecção de micoplasma em condições semelhantes às encontradas no campo, nossa equipe de pesquisa elaborou um estudo com o objetivo de recriar protocolos de vigilância comuns para testar marrãs antes de sua introdução nas granjas de porcas. Outros tipos de amostras e ensaios que podem ser considerados de última geração para a detecção de M. hyopneumoniae também foram incluídos no estudo.

Um modelo de transmissão natural de micoplasma entre marrãs

Uma marrã naturalmente infectada com M. hyopneumoniae foi colocada em uma baia, alojada com um grupo de marrãs vazias da mesma idade (n = 30 no total) por oito semanas. A fêmea naturalmente infectada estava no estágio inicial da infecção e sua identificação foi alterada após a introdução (dessa forma nem mesmo os pesquisadores conseguiram discernir entre marrãs livres e infectadas, evitando qualquer viés de amostragem). As amostras foram coletadas de todas as marrãs várias semanas após o contato (Figura 1). Cateteres traqueais profundos, esfregaços laríngeos e amostras de sangue foram coletados de cada porca individualmente em cada evento de amostragem, junto com uma amostra de fluido oral por baia. Além disso, esfregaços brônquicos individuais foram coletados no final do estudo para confirmar a infecção. A presença de anticorpos específicos contra M. hyopneumoniae foi avaliada em amostras de sangue por ELISA, enquanto a detecção de material genético em todas as outras amostras foi avaliada por PCR em tempo real.

Figura 1. Um modelo de infecção natural foi usado para avaliar a detecção de Mycoplasma hyopneumoniae após o contato com uma fêmea infectada. Eixo X: semanas após o contato. As amostras foram coletadas em marrãs do dia 0 a 8 semanas após o contato.
Figura 1. Um modelo de infecção natural foi usado para avaliar a detecção de Mycoplasma hyopneumoniae após o contato com uma fêmea infectada. Eixo X: semanas após o contato. As amostras foram coletadas em marrãs do dia 0 a 8 semanas após o contato.

Sem surpresas na detecção de micoplasma

Conforme esperado, a transmissão de M. hyopneumoniae entre as fêmeas ocorreu lentamente e a maioria das amostras clínicas em marrãs vazias foram negativas para o patógeno, especialmente durante as primeiras semanas após o contato com a marrã infectada (ver Figura 2 ). Só depois de oito semanas, oito das 29 marrãs foram infectadas com micoplasma. Seis semanas após o contato, uma fêmea não tratada testou positivo para micoplasma em cateteres traqueais profundos e esfregaços laríngeos, e somente oito semanas após o contato é que essa fêmea infectada apresentou anticorpos positivos. É importante observar que os fluidos orais permaneceram negativos para detecção de micoplasma durante todas as oito semanas do estudo.

Figura 2. Proporção de marrãs positivas por contato de Mycoplasma hyopneumoniae de acordo com o tipo de amostra e o tempo após o contato com uma marrã infectada.
Figura 2. Proporção de marrãs positivas por contato de Mycoplasma hyopneumoniae de acordo com o tipo de amostra e o tempo após o contato com uma marrã infectada.

Embora M. hyopneumoniae tenha sido detectado ao longo do estudo usando cateteres traqueais profundos e/ou swabs laríngeos em marrãs naturalmente infectadas, a soroconversão foi retardada e só foi identificada pela primeira vez seis semanas após a infecção.

Oportunidades para otimizar os protocolos de vigilância de micoplasma

A partir dos resultados dessa pesquisa, a mensagem é muito clara: o tempo após a exposição e o tipo de amostra usada para os testes de M. hyopneumoniae são cruciais e influenciarão significativamente a capacidade de detectar esse patógeno. Amostras coletadas do trato respiratório inferior, por exemplo cateteres traqueais profundos, ofereceram a maior sensibilidade entre os tipos de amostra. Sabendo que um programa de vigilância abrangente é fundamental para prevenir surtos de doenças em granjas de porcas, é fundamental que os profissionais revisem os protocolos existentes e os reprojetem com base nas informações de diagnóstico mais atualizadas. Os protocolos de vigilância não devem se tornar uma tradição. Os profissionais da suinocultura podem contar com pesquisas de campo para aprimorar sua estratégia de prevenção da doença por micoplasma.

Este estudo foi financiado pelo Minnesota Pork Board e Pork Checkoff.

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