Diagnóstico laboratorial: doença do edema

Testes disponíveis

Cultivo bacteriano

• Isolamento de organismos vivos

• Tipo de amostra: fezes, conteúdo intestinal.

• Prós:
  • As bactérias são fáceis de cultivar em 1 dia.
  • Fácil para fazer em qualquer laboratório (mesmo interno).
  • Custo relativamente baixo.
• Contras:
  • Algumas E. coli formam parte da flora intestinal normal.
  • Os suínos tem diferentes E. coli ao mesmo tempo.

  • Se os suínos forem previamente tratados com antibióticos, isso pode prevenir o crescimento bacteriano.

Susceptibilidade antimicrobiana (antibiograma)

• Teste in vitro: capacidade de um organismo vivo crescer sob baixa concentração específica de diferentes antimicrobianos.
• Tipo de amostra: fezes, conteúdo intestinal.
• Prós:
  • Identificação de susceptibilidade ou resistência de cepas específicas a antimicrobianos comuns.
  • Identificação de tendências de resistência aos antimicrobianos.
• Contras:
  • Requer um isolado bacteriano.
  • Os testes in vitro podem diferir ligeiramente dos resultados in vivo.
  • Alguns antimicrobianos específicos podem não ser incluídos ou exigir testes especiais separados.

  • Custo moderado.

Histopatologia

• Avalia a presença de lesões em tecido (danos) que podem confirmar a presença da doença. As vezes, a presença de organismos também podem ser detectada diretamente (bactérias e parasitas) ou indiretamente (vírus) usando colorações especiais adicionais.

• Tipo de amostra: tecidos.

• Prós:
  • Associa a adesão bacteriana com o dano intestinal.
  • Não necessita coloração especial.
• Contras:

  • Os tecidos intestinais devem ser fixados com formaldeído dentro de 15 minutos após a morte do animal, pois o tecido intestinal se decompõe rapidamente.

  • A doença pode se segmentar, portanto, várias amostras intestinais devem ser enviadas.

Genotipagem

• Técnica de PCR (reação em cadeia da polimerase) que detecta a presença de uma sequência específica de ácidos nucléicos (DNA) associada a genes de virulência conhecidos.

• Prós:
  • Realizado mediante PCR; fácil de fazer.
  • Ajuda a identificar a patogenicidade ao detectar a presença de genes (não necessariamente a expressão de genes) associados com fatores de virulência.
    • Genes de toxinas: EAST1, LT, STa, STb, Stx1, Stx2, Stx2e.
    • Genes de Pilus: F18, F41, K88 (F4), K99 (F5), 987P (F6).
    • Genes de adesinas: AIDA, EAEA, PAA
  • Facilita a seleção adequada da vacina (combinando pili correto)
  • Ajuda a confirmar que o isolado possui genes para a doença do edema.

Genes de E. coli detectados mediante genotipagem por PCR e por sua função. Os genes destacados em vermelho são importantes para o diagnóstico da doença do edema.

• Contras:
  • Requer isolamento bacteriano.
  • Os suínos podem ter mais de uma cepa ao mesmo tempo, portanto, temos que confiar que isolamos a cepa correta.
  • Preço moderado, mas normalmente apenas um isolado é analisado.

Interpretação dos resultados:

Cultivo bacteriano:

• Deve ser uma E. coli hemolítica.
  

  

• Pureza:
  • Crescimento puro: altamente sugestivo de que está contribuindo para a doença.

  • Crescimento misto: valor questionável.

• Quantidade:
  • Alta: altamente sugestivo de que está contribuindo com a doença.
  • Moderada: interpretação variável.
  • Baixo: valor questionável (poderia ser um contaminante).
  • Sem crescimento: Animal possivelmente tratado previamente com antibióticos ou agente sem contribuição significativa.

Susceptibilidade antimicrobiana (antibiograma):

• Suscetível: possível boa opção de tratamento se o antimicrobiano puder atingir o tecido-alvo.
• Resistente: tem que selecionar um antimicrobiano diferente.
• CIM: se a (concentração inibitória mínima) for realizada, deve-se garantir que o antimicrobiano selecionado atinja o valor da CIM indicado no órgão-alvo.

Histopatologia:

• Positivo: Forte associação como causa se for capaz de demonstrar lesões intestinais com E. coli aderindo as células epiteliais.

• Negativo: Sem lesões intestinais.

Genotipagem:

• A genotipagem é necessária para confirmar que o isolado possui fatores de virulência associados à doença edema.

  • Deve ser F4 ou F18.
  • Deve ter a toxina shiga (Stx2e).

Cenário

Suínos com diarreia pós- desmame:

• Colete swabs retais de 2 ou mais animais com diarreia, não tratados com antibióticos e envie-os para cultura bacteriana, antibiograma e genotipagem

• Eutanásia 1-3 leitões com diarreia que não tenham recebido tratamento. Colete imediatamente 3 amostras de intestino de cada leitão e coloque-as em solução de formaldeído. Colete amostras frescas de intestino para enviá-las refrigeradas para cultura bacteriológica, antibiograma e genotipagem.